Анализ крови на маркеры системной красной волчанки

Описание

Антинуклеарный фактор на клеточной линии HEp-2 (АНФ) — это тест для выявления антинуклеарных антител методом непрямой иммунофлюоресценции.

При системной красной волчанке (СКВ) и других системных ревматических заболеваниях, иммунный ответ направлен против нуклеопротеиновых антигенов, т.е. комплексов нуклеиновых кислот и белков. Эти эндогенные нуклеопротеиновые комплексы образуются в ходе процесса апоптоза эпителиоцитов и напоминают чужеродные вирусные частицы. Ускорение процессов апоптоза под действием ультрафиолетового облучения, вирусных инфекций и лекарственных препаратов, запускает аутоиммунные ответы при СКВ. При апоптозе основные антигены антител конденсируются в апоптотических тельцах, которые становятся мишенью для аутоантител. В настоящее время описаны около 200 разновидностей антител к нуклеопротеинам и рибонуклеиновым кислотам, которые получили название антинуклеарные антитела. При аутоиммунных заболеваниях аутоантитела к ядерным антигенам не обладают прямым цитотоксическим действием на клетки человека, однако иммунные комплексы способны запускать иммунологическое воспаление особенно в местах, где сосуды особенно тонки, в том числе в почках, коже, ЦНС, синовиальной оболочке суставов, плевре.

Исследование антинуклеарного фактора (АНФ) представляет собой основной метод выявления антинуклеарных антител, позволяя выявлять аутоантитела к нуклеиновым кислотам (дсДНК, осДНК, РНК), рибонуклеопротеинам, а также большинству конформационных и нерастворимых антигенов.

Антинуклеарные антитела обнаруживаются благодаря их связыванию с внутриклеточными антигенами перевиваемой линии клеток эпителия человека (HEp-2). Ядро и цитоплазма клеток НЕр-2 содержит все антигены, характерные для человеческого организма, что позволяет выявлять в одном тесте все основные антинуклеарные антитела. Метод непрямой иммунофлюоресценции на клеточной линии НЕр2 рекомендован в качестве золотого стандарта выявления антинуклеарных антител ведущими европейскими (EASIgroup2010) и американскими экспертами (ACRANATaskforce2008). В силу многообразия антигенов антинуклеарных антител, не все они могут быть очищены или синтезированы для использования в иммуноферментных тестах по выявлению антинуклеарных антител.

Позитивность по АНФ на клеточной линии НЕр-2 отмечается при системной красной волчанке (СКВ), системных ревматических заболеваниях и многих аутоиммунных заболеваниях, что делает его универсальным тестом в обследовании больных с аутоиммунной патологией. Положительный результат АНФ отмечается более чем у 90% больных с диффузными болезнями соединительной ткани, такими как системная красная волчанка и кожные формы этого заболевания, склеродермия и ее разновидности, смешанное заболевание соединительной ткани, синдром Шегрена. Выявление АНФ имеет большое значение в диагностике ювенильного ревматоидного артрита и аутоиммунных заболеваний печени. Представители этого семейства аутоантител могут быть обнаружены при множестве других аутоиммунных (тиреоидит, диабет), инфекционных (вирусный гепатит), воспалительных и онкологических заболеваний. Встречаемость АНФ достигает 1–3% у клинически здоровых людей и несколько возрастает у лиц старше 65 лет. Лица с высокими титрами АНФ имеют повышенный риск развития аутоиммунных заболеваний.

 

Что такое антинуклеарные антитела

Свечение антител в микроскопе

Антинуклеарные антитела — это патологические компоненты иммунной системы, ведущие к возникновению аутоиммунных заболеваний соединительной ткани, таких как системная красная волчанка, синдром и болезнь Шегрена, системная склеродермия.

Антинуклеарные антитела представляют из себя белки-иммуноглобулины, вырабатываемые защитными клетками человеческого тела (лимфоцитами). Из-за сбоя в работе иммунной системы ядра собственных клеток распознаются ею как чужеродные и вредные, что приводит к ошибочной выработке антител к разным компонентам клеточных ядер.

Всего выявлено более 190 компонентов ядра, к которым может вырабатываться патологический иммунный ответ, однако диагностическое значение имеют около 20 из них. К наиболее важным относят антитела к одно- и двуспиральной ДНК, гистонам, нуклеосомам и рибосомальному P-протеину.

Ядро содержится практически в любой клетке человеческого тела, за исключением некоторых кровяных. Оно находится внутри клетки и защищено собственной оболочкой, цитозолем и внешней клеточной мембраной. Антитела находятся во внеклеточной среде и чаще всего не могут напрямую контактировать с ядром, повреждая его. Однако при любом нарушении целостности клеточных оболочек антинуклеарные антитела, если они имеются в организме, способны связываться с компонентами ядра, образуя нерастворимые комплексы. Именно они и являются причиной возникновения разнообразных аутоиммунных заболеваний соединительной ткани.

https://youtube.com/watch?v=DsbeEitnBtk

Описание анализа

«Золотой стандарт» выявления антинуклеарных антител (АНА) и диагностики аутоиммунных заболеваний — это определение антинуклеарного фактора (АНФ).

Причина системных заболеваний соединительной ткани (СЗСТ) взаимосвязана с повышенной выработкой антител к своим же клеткам и расстройствами в иммунной системе. Аутоантитела к компонентам ядер клеток — антинуклеарные антитела (АНА) — взаимодействуют с антигенами цитоплазмы, с белками ядра клетки и нуклеиновыми кислотами, вследствие чего возникают воспалительные изменения в тканях и органах, выраженное утомление, боли в суставах и мышцах, потеря веса, кожные изменения.

При многих аутоиммунных заболеваниях обнаруживаются АНА, но наиболее характерны для системной красной волчанки (СКВ). У больных системными заболеваниями соединительной ткани более, чем у 90%, встречается АНА, которых насчитывается около 200 видов и объединенных общим названием — антинуклеарный фактор (АНФ)

Важное клиническое значение и определение тактики дальнейшего обследования пациента имеет тип свечения, по которому можно установить мишени антинуклеарных антител. Основные типы окрашивания: ядрышковый, гранулярный (мелко-/крупно-), центромерный, периферический и цитоплазматический

Каждому типу свечения присущи очень характерные признаки, которые позволяют отличить один вариант от другого

Основные типы окрашивания: ядрышковый, гранулярный (мелко-/крупно-), центромерный, периферический и цитоплазматический. Каждому типу свечения присущи очень характерные признаки, которые позволяют отличить один вариант от другого.

Гомогенное (диффузное) окрашивание при наличии антител к двуспиральной ДНК и белкам гистонам — характерно для лекарственной волчанки и СКВ.

При периферическом свечении — периферическое распределение хроматина в ядре, связано с антителами к ДНК и специфично для СКВ.

Гранулярное (сетчатое, крапчатое) окрашивание наблюдается чаще, менее специфичное, встречается при большинстве аутоиммунных заболеваний. В данном случае аутоантигенами являются нуклеопротеиновые комплексы в ядре (Sm, PCNA, SS-A, U1-RNP, SS-B антигены).

На смешанное заболевание соединительной ткани указывают очень высокие титры АНФ с крупногранулярным типом свечения.

Нуклеарное (ядрышковое) окрашивание связано с образованием антител к компонентам ядрышка (NOR, PHК-полимераза-1, PM/Scl, U3RNP), выявляется при болезни Шегрена, склеродермии. Иногда АНА увеличиваются и при кожных заболеваниях (пузырчатке, псориазе), при эндокринных заболеваниях (тиреоидите, сахарном диабете 1-го типа, тиреотоксикозе, полиэндокринном синдроме), при беременности, у больных на гемодиализе, после трансплантации органов и тканей.

Центромерное свечение обнаруживают антитела к хромосомным центромерам, что характерно для CREST-синдрома (формы склеродермии).

Антитела к тРНК-синтетазе встречаются при цитоплазматическом типе свечения, в частности к Jo-1, что характерно для полимиозита и дерматомиозита. Характерно такое свечение при первичном билиарном циррозе, аутоиммунном гепатите.

Одновременное выявление разных типов свечения указывает на присутствие разных видов антител.

Мелкогранулярное свечение обнаруживается у здоровых людей чаще при низких, умеренных или высоких титрах АНА, но в норме не должны определяться гомогенные или крупнозернистые типы свечения.

Дальнейшая тактика лечения пациента зависит от оценки результатов типа свечения, согласно им уже разрабатываются и назначаются дополнительные исследования, уточняющие спектр АНА.

 

Антинуклеарные антитела (АНА)

С помощью АНА теста можно определить наличие в крови антинуклеарных антител (антител к ядерным антигенам).

АНА – это группа специфических аутоантител, которые производит иммунная система нашего организма в случае аутоиммунных нарушений. Антитела оказывают повреждающее действие на клетки организма. При этом человек испытывает различные болезненные симптомы, например боль в мышцах и суставах, общую слабость и др.

Обнаружение в сыворотке крови антител принадлежащих к группе АНА (например, антител к двуспиральной ДНК) помогает выявить аутоимунное заболевание, контролировать течение болезни и эффективность его лечения.

1

Исследование крови на АЦЦП

2

Анализ крови на С-реактивный белок

3

Исследование крови на АЦЦП

Когда необходим анализ крови на антинуклеарные антитела

Выявление антинуклеарных антител может быть признаком следующих аутоиммунных заболеваний:

• полимиозит;
• дерматомиозит;
• системная красная волчанка;
• смешанное заболевание соединительной ткани;
• склеродермия;
• синдром и болезнь Шегрена;
• синдром Рейно;
• аутоиммунный гепатит

Как выполняется тест на антинуклеарные антитела

Кровь на антинуклеарные антитела берется из вены на локтевом сгибе, натощак. Перед исследованием можно не придерживаться никакой диеты.

В некоторых случаях, для того чтобы дифференцировать различные аутоиммунные заболевания, могут потребоваться дополнительные уточняющие тесты на аутоантитела из группы антинуклеарных антител, так называемый иммуноблот АНА.

Что обозначают данные теста

Антинуклеарные антитела (другое название – антинуклеарный фактор) указывают на наличие какого-то аутоиммунного нарушения, однако не указывают точно на болезнь, вызвавшую его, поскольку тест на АНА является скрининговым исследованием. Цель любого скрининга – выявить людей с повышенным риском того или иного заболевания.

У здорового человека с нормальным иммунитетом антинуклеарных антител в крови быть не должно или их уровень не должен превышать установленные референсные значения.

Нормальное значение АНА подразумевает титр антител, не превышающий значение 1: 160. Ниже этого значения анализ считается отрицательным.

Положительный анализ на антинуклеарные антитела (1:320 и более) указывает на повышение антинуклеарных антител, и наличие у человека заболевания аутоиммунной природы.

В настоящее время для выявления антинуклеарных антитела используются две методики: непрямую реакцию иммунофлюоресценции с использованием так называемой клеточной линии Нер2 и иммуноферментный анализ. Оба теста дополняют друг друга, в связи с чем их рекомендуют выполнять одновременно.

Можно выделить следующие виды антинуклеарных тел АНА в реакции непрямой иммунофлюоресненции:

• гомогенная окраска – может быть при любом аутоиммунном заболевании;
• пятнистая или крапчатая окраска может быть при системной красной волчанки, склеродермии, синдроме Шегрена,  ревматоидном артрите, полимиозите и смешанном заболевании соединительной ткани;
• периферическая окраска – характерна для системной красной волчанки;

При положительном анализе на антинуклеарные антитела необходимо провести иммуноблот антинуклеарных антител для уточнения типа аутоиммунного заболевания и постановки диагноза.

Показания к проведению исследования

Трактовать результаты вправе врач иммунолог и любой дипломированный специалист, в зависимости от области поражения.

Показаниями для проведения данного исследования служат:

1. Выявление системных заболеваний, а также аутоиммунных нарушений без явных симптомов.
2. Обнаружение системной красной волчанки и ее комплексное исследование, подбор стратегии лечения.
3. Выявление лекарственной волчанки.
4. Наличие определенных клинических проявлений, таких как, длительная лихорадка без явной на то причины, ломкость суставов и их болезненность, кожная сыпь, ломота мышц, высокая степень утомляемости.
5. Признаки симптоматических проявлений смешанных заболеваний: болезни кожи и внутренних органов, судорожные состояния, увеличение температурных показателей.
6. Назначение медикаментов дизопирамид, гидралазином и прочее.

Подготовка

Забор биоматериала осуществляется в утренние часы. Сдавать кровь необходимо натощак. Последний прием пищи должен быть совершен минимум за 4 часа. При этом пить воду допустимо в любое время и в любых количествах. Под запретом употребление алкоголя.

За 1 день до исследования показан покой. Физические и психоэмоциональные нагрузки нередко приводят к ложному результату. За полчаса до сдачи крови запрещено курить.

Необходимо поставить в известность врача о принимаемых медикаментах во время назначения им анализа АНФ. Это обусловлено тем, что активные компоненты некоторых препаратов провоцируют выработку антител и также могут стать причиной лекарственной волчанки. Ложноотрицательные результаты нередко являются следствием приема глюкокортикостероидов.

Если пациенту были назначены физиопроцедуры или инструментальные обследования, их необходимо проводить только после сдачи крови.

Виды исследований и их описание

В настоящее время обнаружить антитела в биоматериале возможно несколькими способами:

С помощью непрямой иммунофлуоресцентной микроскопии. Если специфические вещества присутствуют в крови, они начнут связываться с особыми ядерными антигенами. В лабораториях используются элементы, которые способны светиться в отдельном спектре. Затем биоматериал тщательно изучается под микроскопом. Заболевание можно заподозрить по типу свечения. Данный способ признан самым информативным в отношении определения значения антинуклеарных антител. Одной из разновидности методики является исследование с использованием клеток НЕр. Анализ АНФ в этом случае подразумевает забор биоматериала и с гортани. Процесс не сопряжен с возникновением болезненных и иных дискомфортных ощущений

Важно знать, что анализ крови АНФ НЕр-2 — это в настоящее время самое точное исследование. Эпителиальные клетки с гортани инкубируют с сывороткой, после чего их также соединяют с флуоресцентными веществами.
С помощью иммуноферментного анализа

Его суть заключается в том, что когда происходит взаимосвязь антител и антигенов, цвет раствора меняется. Наличие того или иного оттенка позволяет заподозрить наличие определенной патологии.

Расшифровкой АНФ-анализа должен заниматься лечащий врач. При наличии положительных результатов исследований назначаются дополнительные тесты. Окончательный диагноз не ставится на основании заключения одного анализа.

Методы выявления АНА

Иммунологическая наука к изучению антинуклеарного фактора вплотную подошла к середине прошлого века, а с 1982 года, когда впервые была использована перевиваемая клеточная линия человека HEp-2, ставшая золотым стандартом обнаружения АНА, стали активно дорабатываться и добавляться другие методы. Сейчас иммунология и КДЛ используют несколько методик.

Метод непрямой иммунофлюоресценции, разработанный в самом начале 80-х (1982), на сей день считается наиболее популярным и доступным. Он предполагает участие HEp-2-клеток, извлеченных из опухоли гортани человека. Для определения АНФ выявляются иммуноглобулины класса G (IgG), ибо представители иных классов особой роли не играют. Основа метода – соединение АНА с конкретными ядерными мишенями. Исследование проходит под люминесцентным микроскопом. Расшифровка анализа проводится на основании полученных данных – тип свечения, титр АНА (норма – титр менее 1:160).

Рисунок: типы свечения и диагностические выводы

Метод двойной иммунодиффузии (качественный анализ) требует большой концентрации АНА, поэтому он менее чувствительный, нежели предыдущий метод. Однако данный недостаток с лихвой компенсируется высокой специфичностью. К тому же, он простой, в какой-то специальной аппаратуре не нуждается, как и в применении антигенов высокой очистки. Разновидность иммунодиффузии – контрэлектрофорез также является качественным методом, позволяющим увеличить чувствительность и сократить время проведения исследования.

Иммуноферментный анализ (ИФА) обладает высокой чувствительностью, обеспечивая быстрый и надежный количественный результат в лабораториях небольших медицинских учреждений. Но при всех достоинствах у иммуноферментного анализа тоже есть свои недостатки: он требует контроля качества, поскольку стандартизация тест-систем и отображаемость результатов основаны на качестве данного исследования.

Возможности иммуноблоттинга в плане чувствительности и специфичности превосходят способности всех предыдущих методов. Он отличается умением выявлять сывороточные АТ к антигенам определенного молекулярного веса, что позволяет не только найти редко встречающиеся антинуклеарные антитела, но и дать им полную характеристику. И еще чем хорош иммуноблоттинг: он не нуждается в высокоочищенных антигенах и не требует контрольных и референсных реагентов. Но и этот метод, не глядя на свое превосходство над остальными, рекомендуется использовать не в изолированном виде, а вместе с другими методами (с целью повышения чувствительности).

Подготовка к анализу и методика проведения исследования

Определение антител может быть выполнено в нескольких вариантах

Анализ сдается утром натощак либо в другое время, однако не ранее 5-6 часов после последнего приема пищи. Также желательно не принимать никакие лекарственные средства до взятия крови на исследование.

Существует несколько вариантов проведения анализа, отличающихся по своей точности и возможности количественной оценки концентрации антител.

Скрининговое ИФА-исследование (иммуноферментный анализ) позволяет выявить наличие суммарных антинуклеарных антител и их титра. К плюсам метода относится его относительная дешевизна и возможность выяснить, необходимы ли расширенные исследования. При отрицательном результате анализа дальнейшие исследования чаще не показаны.

Непрямая флуоресцентная микроскопия — это метод, основанный на окрашивании антител специальными веществами, дающими под ультрафиолетовым светом зеленое свечение. Тип и характер свечения позволяет врачу лабораторной диагностики определить, с какими компонентами клетки связались антитела, а также примерно узнать их количество.

Иммуноблот-исследование позволяет определить наличие каждого типа антинуклеарных антител по отдельности. Чаще всего этот анализ назначается после положительного результата другого исследования для уточнения диагноза.

Виды обследования

Обнаружить антитела в крови удается двумя способами. Первая методика называется непрямая иммунофлуоресцентная микроскопия. При наличии антител они будут связываться со специфическими ядерными антигенами. Используются элементы, которые светятся в отдельном световом спектре. Под микроскопом появляется возможность выявления типа свечения.

Этот способ признан самым лучшим для определения значения антинуклеарных антител. Также методика получила второе название — волчаночные тест-полосы. Вторым методом диагностирования выступает ферментный иммунный анализ. Его смысл заключается в том, что антитела, находящиеся в крови, попадают во взаимосвязь с антигеном и в итоге раствор меняет свой оттенок.

Обязательно назначается дополнительное исследование, с помощью которого удается определить недуг на ранней стадии. В случае отрицательного скрининга можно предполагать полное отсутствие нарушений. Однако и это вовсе не исключает наличия у пациента аутоиммунного заболевания.

Сдается кровь на антинуклеарный фактор совместно с другими анализами. Но на конечный результат оказывает влияние прием некоторых медикаментов и наличие у пациента патологий хронического и острого течения. Разобрать все эти моменты поможет специалист, затем установит верный диагноз и посоветует, как поступить дальше.

Как правильно подготовиться к исследованию

Материалом для анализа выступает венозная кровь.

Особенности подготовки:

Материал берут на голодный желудок. После последней трапезы должно пройти, как минимум, 8 часов. Допустимо пить качественную фильтрованную воду без газа. Предварительно за два часа перед забором крови исключается курение и использование никотиновых продуктов.
За несколько дней до совершения манипуляции исключается потребление спиртных напитков и энергетиков, запрещено заниматься тяжелым физическим трудом.
За две недели должен полностью исключаться прием фармацевтических средств, в частности, гормонов, антибиотиков и прочих медикаментов

В целях подтверждения исследования важно повторить скрининг через две недели.

Ожидайте результатов в течение 48 часов после процедуры. Возможно получение данных в экстренном порядке в течение 3 часов.

Трактовка результатов

При качественном исследовании могут быть получены такие результаты:

• ниже 0,9 —отрицательный, норма;
• значения от 0,9 до 1,1 — сомнительный;
• свыше 1,1 — позитивный.

Пациенты часто задают вопрос: антинуклеарный фактор 1:160 норма или нет? Все, что выше этого показателя, выходит за пределы нормы.

Стоит также учитывать, что неправильная подготовка и некоторые нюансы могут повлиять на результаты:

1. Нарушение принципов подготовки.
2. Несоблюдение правил алгоритма инъекции медицинским специалистом.
3. Прием определенных фармацевтических средств.
4. Диагноз уремия может также исказить результаты.

Неправильная подготовка и некоторые нюансы могут повлиять на результаты анализа

Положительный скрининг на антиядерные антитела может говорить о наличии таких недугов, как красная волчанка, патология поджелудочной железы, наличие нарушений функциональности щитовидной железы, патологии печени, синдром Шегрена, поражение тканей легких, суставов и многое другое. Только доктор может интерпретировать результаты и назначать дальнейшее лечение.

 

Если скрининг на данные антитела положительный без сопровождающейся симптоматики, необходимо пройти более тщательное обследование.

 

 

Какие группы антигенов используются при исследовании?

При расшифровке материалов всегда необходимо брать во внимание, что в спектр АНА входит довольно большая группа аутоантител к нуклеопротеидам, рибонуклеопротеидам, гистонам, ДНК и другим структурным единицам ядра. Из этого следует, что функционал теста направлен на выявление антител к составляющим ядра и цитоплазмы, которые изначально были определены при СКВ

Позже диагностические возможности исследования были расширены, что обусловлено определением подобных антител при других СЗСТ. В скрининговых методиках для обнаружения суммарных АНА, как правило, применяется определенный набор антигенов, принятых за основные маркеры аутоиммунных ЗСТ.

К ним относятся антитела класса IgG:

• SS-A (Ro) – ядерные рибонуклеопротеины;
• SS-B (La) – ядерные белки;
• Scl-70 – белок-фермент (топоизомераза-1);
• нативная двухцепочная ДНК;
• RNP/Sm – комплекс антигенов;
• Jo-1 – фермент РНК – синтетаза;
• CENP-B (центромера)
• Hep-2 клетки;
• митохондрии (PDC).

АНА практически безвредны для организма – они не способны проникать в живые ткани. Но в отдельных случаях могут соединяться в комплексы антиген-антитело, что в результате приводит к структурным разрушениям тканей. Одним из таких примеров является поражение паренхимы почек при СКВ. Так как при СЗСТ в процесс вовлечено несколько органов, то выявление АНА не является первостепенно важным для диагностики, а считается лишь подтверждением определенной симптоматики.

Возможности анализа АНФ, выраженные в процентном соотношении

АНФ анализ: расшифровка и результаты

После прохождения АНФ анализа врачи получают результаты, которые нужно расшифровать и проанализировать. Это необходимо для определения наличия или отсутствия определенных заболеваний и оценки общего состояния организма.

В результатах АНФ анализа могут быть указаны следующие показатели:

1. Уровень общих антиоксидантов. Этот показатель отражает способность организма противостоять окислительному стрессу. Высокий уровень антиоксидантов говорит о хорошем общем состоянии организма, а низкий уровень может указывать на наличие хронических заболеваний.

2. Показатель перекисного окисления липидов. Этот показатель отражает уровень окислительного стресса в организме. Высокое значение может свидетельствовать о нарушении процессов обмена и усилении окислительного стресса.

3. Уровень глюкозы. Этот показатель применяется для определения наличия диабета. Повышенный уровень глюкозы может свидетельствовать о нарушении функции поджелудочной железы и сахарного диабета.

5. Показатель мочевой кислоты. Этот показатель позволяет оценить обмен веществ и функцию почек. Повышенный уровень мочевой кислоты может говорить о наличии подагры и других заболеваний.

6. Уровень железа. Этот показатель позволяет определить наличие или отсутствие анемии.

7. Показатель C-реактивного белка. Этот показатель используется для определения наличия воспалительных процессов в организме.

8. Уровень аминокислот. Этот показатель отражает общую картину обмена аминокислот и может использоваться для оценки общего состояния организма.

9. Показатель масляных кислот. Этот показатель выявляет дисбаланс между воспалительными и противовоспалительными процессами в организме.

10. Уровень витаминов и микроэлементов. Эти показатели позволяют оценить наличие или дефицит витаминов и микроэлементов в организме.

Факторы, способные исказить результаты

На достоверность полученных в ходе исследования данных могут повлиять всего несколько факторов, способных показать и ложноположительный и ложноотрицательный результат. Так, неправдоподобные ответы со сдвигом вверх наблюдаются у пожилых пациентов в возрасте от 60 лет (по статистике в 10–37% случаях) и при приеме медпрепаратов, вызывающих лекарственную волчанку (некоторые антибиотики, контрацептивы, сульфаниламиды, тиазидные диуретики).

Отмечено, что у 5–55% особ женского пола, имеющих грудные имплантаты, повышается уровень концентрации АНА. К ошибочной диагностике со сдвигом вниз может привести употребление глюкокортикоидных препаратов – Преднизолона, Метипреда или Дексаметазона.

Антинуклеарный фактор

Антинуклеарный фактор
– лабораторный анализ, направленный на определение различных видов специфических иммуноглобулинов к структурам клеточного ядра. Показатель АНФ повышается при системных заболеваниях соединительной ткани. Тест выполняется с целью их диагностики, дифференциации, контроля лечения, выявления обострений. Назначается при клинических и лабораторных признаках системной красной волчанки, склеродермии, синдрома Шарпа, Шегрена, ревматоидного артрита, воспалительной миопатии. Исследованию методом РНИФ подвергается сыворотка венозной крови. Нормальный показатель – титр не выше 1:160. Сроки подготовки данных теста – 8 рабочих дней.

В основе ревматических болезней лежит аутоиммунная реакция против структур ядра клетки – комплексов из протеинов и нуклеиновых кислот. Антигены образуются при программированной гибели эпителиоцитов и лимфоцитов. Ультрафиолетовые лучи, инфекционные агенты, лекарства ускоряют разрушение клеток, замедляют удаление апоптозных телец, провоцируют развитие аутоиммунных процессов. Антитела к структурам ядра представлены множеством видов, при исследовании антинуклеарного фактора выделяется около восьми. Преимуществом теста является высокая специфичность – определяются антитела, которые невозможно очистить для ИФА. Однако часть иммунных комплексов экстрагируется в плазму при выполнении РНИФ, поэтому существует вероятность ложноотрицательного результата.

Симптомы, когда стоит сдать анализ

Всегда есть симптомы, появление которых должно насторожить человека, заставить его пройти обследование. Врач должен сориентировать пациента, если есть:

1. Артрит, проявляющийся воспалением сустава, с болью, отеками, нарушенной подвижностью, покраснением кожи над ним, повышением температуры.
2. Не помешает обследование при перикардите, плеврите, причина которых неизвестна.
3. Поражение почек, связанное с нарушением состояния иммунной системы, появление изменений в анализе мочи, в частности, белка, крови.
4. Еще одним показанием является гемолитический вариант анемии, при которой в большом количестве разрушаются эритроциты, повышается уровень билирубина в крови, анализе мочи.
5. Показанием является понижение уровня тромбоцитов, нейтрофилов в формуле лейкоцитов.
6. Проявления на коже в виде сыпи, утолщения, которые возникают после пребывания на солнце.
7. Синдром Рейно, при котором периодически свой цвет меняют пальцы на стопах, кистях. Они становятся бледными, синими или краснеют, нарушается чувствительность, беспокоит боль.
8. Показанием является нехарактерная симптоматика со стороны неврологии или психиатрии.
9. Если повышается температура, развивается усталость, понижается масса тела, увеличиваются лимфатические узлы.

Причина назначения анализа и факторы, влияющие на результат

Как выше сказано, поиск АНФ в первую очередь находится в зоне внимания иммунолога и ревматолога, правда, врачи других специальностей тоже иной раз проявляют интерес к данному исследованию, однако он уже не столь велик, поскольку назначается тест, прежде всего, в случаях:

1. Появления симптомов, указывающих на развитие аутоиммунного процесса, затрагивающего соединительную ткань (лихорадка в течение длительного периода, не отступающие суставные боли, снижение работоспособности, похудение, изменения со стороны кожи);
2. Необъяснимого повышения показателей общего и биохимического анализа крови (увеличения СОЭ, концентрации СРБ – C-реактивного белка, и ЦИК – циркулирующих иммунных комплексов).

Врачи, занятые в области иммунологии и ревматологии используют исследование для:

• Диагностики системной патологии соединительной ткани;
• Дифдиагностики ряда ревматологических заболеваний, симптомы которых, как правило, схожи, но лечение – отличается;
• Оценки эффективности проводимого лечения системных заболеваний соединительной ткани;
• Мониторинга течения аутоиммунных процессов.

В иных случаях могут «выскакивать» ложноположительные или ложноотрицательные результаты.

Ложный плюс можно ожидать у пациентов:

1. После 60-летнего возраста (до 35% случаев);
2. Принимающих фармацевтические средства, которые при длительном применении сами по себе способны дать старт развитию системной красной волчанки. К ним относятся: некоторые антибиотики, сульфаниламиды, мочегонные группы тиазидов, гормональные противозачаточные средства, соли золота и лития, отдельные гипотензивные и многие другие препараты.

Наоборот, ложный минус можно получить при использовании таких гормонов, как дексаметазон, преднизолон, метипред (метилпреднизолон).

Следует заметить, что:

• Разновидность болезни (системной красной волчанки) может быть АНФ-негативной (5%), поэтому при наличии симптомов данной патологии и отрицательном АНФ требуется дополнительное исследование – выявление АТ к SS-антигенам;
• Нельзя воспринимать положительный результат, как неопровержимое доказательство заболевания – в сыворотке 5 – 10% здоровых людей описываемый показатель может быть повышен;
• Полученные в ходе исследования результаты рекомендуется сопоставлять с данными клинической симптоматики и других лабораторных тестов – только комплексный подход способен установить точный диагноз;
• В случае позитивного результата, полученного любым методом, необходимо подтверждение специфичности антинуклеарных антител иммуноблоттингом.

Хотя не особо мнительные люди, случайно пройдя подобное тестирование, могут не придавать своим результатам большого значения, продолжая жить полноценной активной жизнью. Конечно, если не жалуются на свое здоровье. А вот мнительные… Они – наоборот, могут даже и симптомы у себя найти, поэтому подобный анализ крови должен осуществляться только по назначению иммунолога, а не по собственной инициативе пациента.